El Isótopo 15N como Indicador de la Asimilación del Nitrógeno de la Dieta en Rotíferos y Copépodos Utilizados como Alimento vivo en la Acuicultura

Abstract

Los requerimientos nutricionales de rotíferos y copépodos cultivados en condiciones controladas aún no son bien entendidos, debido a la incertidumbre en la cuantificación del consumo y la asimilación del alimento, utilizando métodos indirectos. La adopción de la técnica de isótopos estables enriquecidos, como una medida directa de la asimilación de nutrientes en rotíferos y copépodos, ha demostrado ser viable para determinar la asimilación de nutrientes de diferentes tipos de alimento. El objetivo del presente trabajo es determinar la asimilación de nitrógeno en el rotífero Brachionus plicatilis y el copépodo Pseudodiaptomus euryhalinus, alimentados con las microalgas Nannochloropsis sp., Isochrysis sp. y Thalassiosira weissflogii, utilizando el 15N enriquecido como trazador.
Los rotíferos y copépodos fueron obtenidos del CIAD-Mazatlán, mientras que las cepas de microalgas provienen del laboratorio de cultivos de apoyo de la FACIMAR-UAS-Mazatlán. Las microalgas fueron enriquecidas, reemplazando el 20% del Na14NO3 de la formulación F, por Na15NO3 enriquecido con el 98% de átomos de 15N (Sigma Aldrich Co. USA). Durante los experimentos, los rotíferos y copépodos se aclimataron al tipo y concentración de la microalga sin enriquecer, por al menos una hora, en volúmenes de 12 L y concentraciones de 200 rotíferos y cuatro copépodos por mL, respectivamente. Posteriormente, los rotíferos o copépodos se transfirieron a recipientes de 12 L con la microalga enriquecida con 15N, previamente tamizados y lavados con agua filtrada a 0.2 μm. A continuación, se procedió a tomar muestras con volúmenes de 300 mL, a intervalos de tiempo consecutivos, durante cuatro horas en el caso de los rotíferos, y 13 horas para los copépodos. Durante cada extracción, los organismos experimentales fueron inactivados con agua carbonatada y consecuentemente concentrados y conservados a -80°C, para su posterior liofilización. Una vez liofilizadas, las muestras fueron homogenizadas y empacadas (1 mg) en cápsulas de estaño, y enviadas al laboratorio de isótopos estables de la Universidad de California, Davis, USA, para su análisis. Para cada tratamiento experimental con tres repeticiones, la tasa de asimilación de nitrógeno (%N corporal por hora); se determinó mediante el producto de la pendiente de la regresión lineal (de la relación entre el incremento del 15N átom% con respecto al tiempo) con el reciproco del 15N átom % de la microalga marcada, y el resultado multiplicado por cien.
Los resultados indicaron que los rotíferos tuvieron tasas de asimilación de nitrógeno con valores de 2.57, 3.42 y 1.41 %N corporal∙hora-1, cuando fueron alimentados con las microalgas T. weissflogii, Nannochloropsis sp. e Isochrysis sp., respectivamente. En este mismo orden, los copépodos en los estadios nauplios+copepoditos combinados registraron tasas de asimilación de 2.06, 3.37 y 1.79 %N corporal∙hora-1, mientras que en los copépodos adultos fueron de 0.81, 1.84 y 1.64 %N corporal∙hora-1, para cada microalga respectivamente. Las fluctuaciones en los valores de la tasa de asimilación de nitrógeno en rotíferos y copépodos fueron atribuidas a las características estructurales y bioquímicas de las dietas, así como a la historia de alimentación y el estado nutricional de los animales experimentales. La técnica del 15N enriquecido mostró ser reproducible y eficaz para definir la significancia de la asimilación del nitrógeno de la dieta, por rotíferos y copépodos. Los valores mayores de la asimilación de nitrógeno con periodos cortos de asimilación, obtenidos con la microalga Nannochloropsis sp., confirman los buenos resultados que se tienen al utilizarla como alimento en los cultivos de rotíferos y copépodos.